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热启动LAMP扩增预混液冻干球(HNB显色)图片
产品货号:
MT3106
中文名称:
热启动LAMP扩增预混液冻干球(HNB显色)
英文名称:
HotStart DNA/RNA HNB LAMP Bead
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是用于模板DNA或RNA的LAMP扩增反应冻干微球制剂,包含了热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶、解旋因子Uver、dNTP、Mg2+、反应缓冲、HNB变色指示剂、其它稳定剂,单粒扩增体系为25μL。




本制品中的特制的HNB染料在反应起始前与Mg2+结合产生深紫罗兰色,随着LAMP反应的进行,产生的PPi(无机焦磷酸盐)结合体系中的Mg2+,使得HNB显示出淡绿色。


(HNB-Mg2+复合物)→ (PPi-Mg2+)+(HNB)
深紫罗兰色淡绿色

热启动LAMP扩增预混液冻干球(HNB显色)


组分规格
HotStart DNA/RNA HNB LAMP Bead100粒
说明书1份

保存:-20℃干燥密封,有效期2年。室温密封防潮可稳定保存1年。


  • 本制品包含热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,在>60℃时1min内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;
  • 本制品包含独特的解旋因子Uver,因此,允许在不使用F3/B3引物的情况下进行LAMP扩增(easy LAMP),并允许FIP/BIP的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。
  • Bst4.3 DNA/RNA聚合酶在用于LAMP扩增时的推荐反应温度为65~70℃,最佳反应温度为70℃。由于Uver的反应温度为70℃,因此在进行eLAMP扩增时,反应温度设置为70℃,大幅降低引物Dimer的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;
  • 本制品在1×浓度情况下,对如下试剂的耐受度:
    试剂耐受浓度
    Tris-HCl(pH8.0)≤10mM
    NaOH≤1mM
    Tween20%≤1%
    EDTA(pH8.0)≤20μM
    肝素≤0.5 IU/mL
  • HNB变色指示剂是还原状态下的染料,任何强氧化剂(H2O2、次氯酸钠等)均会破坏HNB变色指示剂的结构,从而直接导致试剂变为深蓝绿色。
  • 防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。



  • 10×LAMP Primer Mix制备:
    本试剂既可以用于标准LAMP扩增,也可以用于eLAMP扩增。
    • 10×标准LAMP Primer Mix:
      FIP/BIP=16μM each;LF/LB=4μM each;F3/B3=2μM each
    • 10×eLAMP Primer Mix:
      FIP/BIP=8μM each;LF/LB=4μM each
      • eLAMP(easy LAMP)为去除F3/B3引物的方法,为Bst4.3专用的使用策略,对于大多数引物组,在Uver的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低,可提高FIP/BIP浓度到12~16μM。
  • 配制LAMP反应体系:
    成分用量
    HotStart DNA/RNA HNB LAMP Bead1粒
    10×LAMP Primer Mix2.5μL
    模板DNA/RNAX μL
    ddH2O至25μL
  • LAMP扩增程序:
    反应体系配好后,按下表条件反应20~30min。
    标准LAMP扩增eLAMP扩增
    65~70℃均可70℃反应
  • 结果判定:反应完毕后观察颜色,紫色为阴性,绿色为阳性扩增。
    热启动LAMP扩增预混液冻干球(HNB显色)

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